腫瘤細胞系異種移植模型

1.實驗原理：

       R-NSG小鼠極度的免疫缺陷使其無法識別和排斥外來的人源腫瘤細胞，為腫瘤細胞的定植和生長提供了近乎“無障礙”的環境。

2.實驗方法

將體外培養的人源腫瘤細胞系（如A549肺癌細胞、MCF-7乳腺癌細胞等）通過皮下、尾靜脈或原位注射的方式植入NSG小鼠。

3.實驗流程：

  ①腫瘤細胞準備：體外培養并收集對數生長期的腫瘤細胞，重懸于PBS或基質膠中；

  ②NSG小鼠準備：選擇6-8周齡NSG小鼠，必須在SPF級屏障設施中飼養，提供無菌免疫缺陷飼料和無菌水。

  ③腫瘤細胞接種：

  a.皮下注射：小鼠背部側方或肩胛骨區域的皮下，此方法最常用，易于監測腫瘤體積。

  b.原位注射：將細胞注射到腫瘤原發器官（如肝臟、乳腺脂肪墊），能更好地模擬腫瘤微環境。

  c.尾靜脈注射：用于建立腫瘤轉移模型。需通過活體成像（如生物發光）或終點組織學分析來評估轉移灶。

 ④腫瘤監測：

  a.腫瘤監測：從接種后約一周開始，每周2-3次用游標卡尺測量皮下腫瘤的長徑；

  b.小鼠健康監測：每日觀察小鼠的精神狀態、活動性、毛發和體重。體重下降超過20%是重要的痛苦指標；

  c.藥物干預：當腫瘤體積達到預設值（如100 mm3）時，開始分組給藥（對照、治療組），并持續監測腫瘤生長曲線。

 ⑤終點分析與樣本收集